英文名稱：Collagenase Assay Kit
中文名稱：膠原蛋白酶檢測試劑盒

膠原酶檢測試劑盒 產(chǎn)品介紹：
膠原蛋白酶是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）家族成員，可降解膠原蛋白Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ。至少確認(rèn)存在3種不同形式膠原蛋白酶（MMP-1, MMP-8和MMP-13）。膠原蛋白酶產(chǎn)生于許多骨髓和非骨髓細(xì)胞。強(qiáng)勁的膠原蛋白酶已在生理學(xué)環(huán)境中發(fā)現(xiàn)，比如產(chǎn)后子宮組織中和蝌蚪變態(tài)后。病理學(xué)環(huán)境比如炎癥和腫瘤轉(zhuǎn)移中也發(fā)現(xiàn)有膠原蛋白。三種類型膠原酶的特異性酶作用底物幾乎是相同的。然而，個別膠原酶可能發(fā)揮不同的生理學(xué)和病理學(xué)作用，膠原蛋白更新取決于組織和細(xì)胞類型。有趣的是有報道稱MMP-13消化分解Ⅱ型膠原蛋白比分解Ⅰ型膠原快十倍。
試劑盒設(shè)計用于檢測哺乳動物膠原酶活性，使用FITC（異硫氰酸熒光素）標(biāo)記游離端肽的可溶液性牛Ⅰ型膠原（#3001）或牛Ⅱ型膠原（#3002）作為底物。兩小時內(nèi)即可檢測出結(jié)果，比傳統(tǒng)檢測方法（膠原凝膠作為底物）快十倍，且比用放射性同位素標(biāo)記的膠原蛋白檢測更靈敏。

檢測原理：哺乳動物膠原酶切割膠原蛋白分子中三條α鏈，形成3/4和1/4膠原蛋白片段。這些肽段的變性溫度為34-35℃和28-29℃，而完整膠原蛋白變性溫度為40℃。因此，這些切割的肽段可在35℃時變性為無規(guī)卷曲構(gòu)象，其可用有機(jī)溶劑提取。通常變性時間為60分鐘，為縮短變性時間，可添加蛋白酶進(jìn)一步消化膠原酶降解產(chǎn)物。

檢測步驟：1)激活樣本中潛在的無活性膠原酶
                     2)與FITC標(biāo)記的可溶性膠原蛋白反應(yīng)
                     3)切割的膠原蛋白片段變性進(jìn)一步降解為更小肽段
                     4)用有機(jī)溶劑提取肽段并測定提取的熒光強(qiáng)度（FI）