核心技術(shù)：專(zhuān)利0.2ul疏水透氣膜，定義高效氣體交換新標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)胞呼吸是關(guān)鍵。傳統(tǒng)培養(yǎng)方式的氣體交換效率往往成為限制細(xì)胞高密度生長(zhǎng)的瓶頸。華雅懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶的核心技術(shù)在于其專(zhuān)利0.2ul疏水透氣膜。這項(xiàng)技術(shù)確保了培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)外環(huán)境能進(jìn)行持續(xù)、均勻、高效的氣體交換（O?/CO?），同時(shí)有效防止液體滲漏和微生物污染。

高效氣體交換：為細(xì)胞提供充足的氧氣，并及時(shí)排出代謝產(chǎn)生的二氧化碳，維持培養(yǎng)環(huán)境pH值穩(wěn)定，從而顯著優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件。

卓越的疏水性：確保在長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)和頻繁操作下，培養(yǎng)液不會(huì)通過(guò)透氣膜滲出，保障了實(shí)驗(yàn)環(huán)境的安全和潔凈。

結(jié)果顯而易見(jiàn)：憑借這一核心技術(shù)，華雅培養(yǎng)瓶能有效改善細(xì)胞生長(zhǎng)速度和功能表現(xiàn)，幫助用戶(hù)輕松獲得更高的細(xì)胞密度和活力，真正實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)效率UPUPUP!

靈活配置：研究與GMP級(jí)可選，多規(guī)格覆蓋全流程應(yīng)用

華雅產(chǎn)品矩陣的設(shè)計(jì)理念是滿足用戶(hù)從基礎(chǔ)探索到商業(yè)生產(chǎn)的全方位需求。

研究級(jí)及GMP級(jí)可選：我們提供RUO（科研級(jí)） 和 GMP（生產(chǎn)級(jí)） 兩種級(jí)別產(chǎn)品。RUO級(jí)別完美適用于基礎(chǔ)研究、工藝開(kāi)發(fā)和前期試驗(yàn)；而GMP級(jí)別則嚴(yán)格按照藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范生產(chǎn)，提供全套可追溯文件，完全滿足細(xì)胞治療、病毒載體生產(chǎn)等先進(jìn)療法領(lǐng)域?qū)τ诤弦?guī)性和安全性的嚴(yán)苛要求。

多規(guī)格可選，滿足不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景：無(wú)論是初期的種子細(xì)胞擴(kuò)增、小規(guī)模條件篩選，還是中試放大乃至大規(guī)模生產(chǎn)，華雅都提供了相應(yīng)的規(guī)格：

MAP30-R/G (30mL)：小巧靈活，適合高通量篩選與早期研發(fā)。

MAP500-R/G (500mL)：中試放大的黃金選擇，是工藝驗(yàn)證的關(guān)鍵橋梁。

MAP1000-R/G/RC/GC (1000mL)：兼顧大規(guī)模生產(chǎn)與密閉式操作，滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求。

總結(jié)

華雅懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶不僅僅是一個(gè)容器，它是一項(xiàng)融合了創(chuàng)新技術(shù)、靈活配置和極致性?xún)r(jià)比的完整細(xì)胞培養(yǎng)解決方案。它讓您無(wú)需在性能與成本之間妥協(xié)，既能保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，又能有效控制科研與生產(chǎn)成本。選擇華雅，就是選擇了一種更智能、更高效的細(xì)胞培養(yǎng)方式。

立即探索華雅產(chǎn)品系列，找到最適合您實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的那一款！

華雅思創(chuàng)生物?專(zhuān)注于提供CGT、分子診斷和先進(jìn)醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品。”買(mǎi)試劑，找華雅”，我們已成為眾多科研機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)的優(yōu)選供應(yīng)商。

產(chǎn)品貨號(hào)：MAP30-R

產(chǎn)品規(guī)格：科研專(zhuān)用（RUO）級(jí)別，30mL工作體積，開(kāi)蓋型操作。

產(chǎn)品概述：面對(duì)眾多的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，如何做出正確選擇？本指南旨在幫助科研人員全面了解華雅MAP30-R的定位與特性，助您判斷它是否是您當(dāng)前研究項(xiàng)目的合適選擇。

產(chǎn)品參數(shù)：產(chǎn)品定位: 科研與工藝開(kāi)發(fā) | 級(jí)別: RUO (Research Use Only) | 核心功能: 小規(guī)模懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

核心優(yōu)勢(shì)：

明確的應(yīng)用場(chǎng)景定位：MAP30-R專(zhuān)為哺乳動(dòng)物懸浮細(xì)胞的擴(kuò)增和回收而設(shè)計(jì)。這意味著它的每一個(gè)設(shè)計(jì)細(xì)節(jié)，從透氣性到瓶身結(jié)構(gòu)，都圍繞這一核心目的進(jìn)行優(yōu)化，確保了在此應(yīng)用下的高性能表現(xiàn)。

可靠的科研數(shù)據(jù)生成：產(chǎn)品批次間的高一致性對(duì)于實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性至關(guān)重要。華雅智能科技穩(wěn)定的生產(chǎn)工藝確保了這一點(diǎn)，使您不同批次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可比性，為您的科研結(jié)論提供堅(jiān)實(shí)可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

無(wú)縫的后續(xù)開(kāi)發(fā)銜接：在MAP30-R平臺(tái)上開(kāi)發(fā)的培養(yǎng)工藝，因其與更大規(guī)格的MAP培養(yǎng)瓶（如MAP500-R, MAP1000-R）采用相同技術(shù)，可以更容易地進(jìn)行線性放大，為您的研究向應(yīng)用轉(zhuǎn)化鋪平道路，適用于從研發(fā)轉(zhuǎn)化至商業(yè)生產(chǎn)的路徑。

選購(gòu)指南：

如果您是：進(jìn)行懸浮細(xì)胞相關(guān)的基礎(chǔ)研究、細(xì)胞株開(kāi)發(fā)、培養(yǎng)基篩選或小規(guī)模工藝摸索，MAP30-R是您的理想選擇。

如果您不確定：懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶哪家好，華雅MAP30-R的專(zhuān)利技術(shù)和明確的設(shè)計(jì)理念是其可靠性的保證。

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MAP 培養(yǎng)瓶（開(kāi)蓋型）使用說(shuō)明

貨號(hào)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 規(guī)格? ? ? ? ? ? 級(jí)別? ? ? ? ?? 工作體積? ? ? ? ? ? ? 最大容量

MAP30-R? ? ? ? ? ? 30 mL? ? ? ?RUO? ? ? ? ? ? 10~25 mL? ? ? ? ? ? 36.5 mL

MAP500-R? ? ? ? ? 500 mL? ? ?RUO? ? ? ? ? ? 50~400 mL? ? ? ? ? 550 mL

MAP1000-R? ? ? ? 1000 mL? ?RUO? ? ? ? ? ? 150~1000 mL? ? ?1500 mL

MAP30-G? ? ? ? ? ? 30 mL? ? ? GMP? ? ? ? ? ? 10~25 mL? ? ? ? ? ?36.5 mL

MAP500-G? ? ? ? ? 500 mL? ? GMP? ? ? ? ? ? 50~400 mL? ? ? ? ?550 mL

MAP1000-G? ? ? ? 1000 mL? GMP? ? ? ? ? ?150~1000 mL? ? ?1500 mL

FAQ：

Q：RUO級(jí)別和GMP級(jí)別有什么區(qū)別？

A：主要區(qū)別在于生產(chǎn)的質(zhì)量體系和控制標(biāo)準(zhǔn)。RUO級(jí)別適用于科研診斷等非藥物用途，而GMP級(jí)別需符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，用于人體治療等臨床用途。

Q：如何開(kāi)始使用？

A：流程簡(jiǎn)單：1) 準(zhǔn)備工作區(qū)與試劑；2) 檢查包裝與瓶體；3) 加入預(yù)熱的培養(yǎng)基和細(xì)胞；4) 混勻后靜置培養(yǎng)。

Q：有哪些注意事項(xiàng)？

A：請(qǐng)勿用器械觸碰瓶底透氣膜；勿過(guò)度填充；勿重復(fù)滅菌使用；如包裝破損或已過(guò)期，請(qǐng)勿使用。

華雅思創(chuàng)生物?專(zhuān)注于提供CGT、分子診斷和先進(jìn)醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品。”買(mǎi)試劑，找華雅”，我們已成為眾多科研機(jī)構(gòu)的優(yōu)選供應(yīng)商。

產(chǎn)品貨號(hào)：MAP30-R

產(chǎn)品規(guī)格：30mL，RUO級(jí)，開(kāi)蓋型設(shè)計(jì)，是傳統(tǒng)細(xì)胞搖瓶的理想替代方案。

產(chǎn)品概述：在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)中，傳統(tǒng)搖瓶正逐漸被更先進(jìn)的技術(shù)所替代。HySmart Labs華雅智能科技MAP30-R培養(yǎng)瓶作為搖瓶的升級(jí)解決方案，以其靜態(tài)培養(yǎng)、卓越性能和便捷操作三大核心優(yōu)勢(shì)，為您提供更優(yōu)的細(xì)胞培養(yǎng)體驗(yàn)。

品牌介紹：華雅智能科技緊跟技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)，推出的MAP系列產(chǎn)品旨在用創(chuàng)新技術(shù)替代傳統(tǒng)方法，提升實(shí)驗(yàn)的效率和可靠性。

產(chǎn)品參數(shù)：對(duì)比對(duì)象: 傳統(tǒng)細(xì)胞搖瓶 | 培養(yǎng)方式: 靜態(tài) vs. 震蕩 | 核心差異: 透氣膜技術(shù)

核心優(yōu)勢(shì)：

從“動(dòng)態(tài)”到“靜態(tài)”的操作革命：搖瓶需要持續(xù)的機(jī)械震蕩，噪音大且占用專(zhuān)用設(shè)備。MAP30-R僅需靜置培養(yǎng)，徹底消除了對(duì)搖床的依賴(lài)，使培養(yǎng)過(guò)程更安靜，實(shí)驗(yàn)室空間利用更靈活。

從“單一”到“雙維”的效能提升：搖瓶通常僅靠瓶蓋進(jìn)行有限的氣體交換。MAP30-R采用上下雙層透氣膜，氣體交換面積更大、效率更高，能更有效地維持培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定，從而改善細(xì)胞生長(zhǎng)速度和功能表現(xiàn)。

從“重復(fù)”到“一次性”的效率飛躍：搖瓶需反復(fù)清洗、滅菌，耗時(shí)耗力且殘留污染風(fēng)險(xiǎn)高。MAP30-R為預(yù)滅菌一次性產(chǎn)品，即開(kāi)即用，省去了繁瑣的后勤準(zhǔn)備工作，并絕對(duì)保障了培養(yǎng)的無(wú)菌性，讓實(shí)驗(yàn)流程更高效、結(jié)果更可靠。

選購(gòu)指南：如果您仍在忍受搖瓶的噪音、空間占用和繁瑣操作，現(xiàn)在是時(shí)候升級(jí)您的實(shí)驗(yàn)方案了。HySmart Labs華雅智能科技MAP30-R是替代搖瓶、邁向更高效科研的明智之選。

訂購(gòu)信息：歡迎聯(lián)系華雅思創(chuàng)客服，咨詢(xún)產(chǎn)品替換方案與訂購(gòu)信息。

FAQ：

Q：替代搖瓶，需要重新建立實(shí)驗(yàn)protocol嗎？

A：基本流程相似。您只需將“震蕩培養(yǎng)”步驟改為“靜置培養(yǎng)”，其他步驟如接種、收獲等均無(wú)需大變，轉(zhuǎn)換成本極低。

Q：靜態(tài)培養(yǎng)的混合效果如何？

A：細(xì)胞在靜置狀態(tài)下會(huì)自然沉降，但在每次補(bǔ)液或操作時(shí)的混勻足以保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的均勻分布。對(duì)于高密度培養(yǎng)，可通過(guò)定期輕柔搖晃重懸細(xì)胞。

Q：成本相比搖瓶如何？

A：雖為一次性消耗品，但節(jié)省了人工清洗、滅菌的成本和水電耗材費(fèi)用，并提升了實(shí)驗(yàn)成功率，綜合性?xún)r(jià)比更具優(yōu)勢(shì)。

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MAP 培養(yǎng)瓶（開(kāi)蓋型）使用說(shuō)明

貨號(hào)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 規(guī)格? ? ? ? ? ? 級(jí)別? ? ? ? ?? 工作體積? ? ? ? ? ? ? 最大容量

MAP30-R? ? ? ? ? ? 30 mL? ? ? ?RUO? ? ? ? ? ? 10~25 mL? ? ? ? ? ? 36.5 mL

MAP500-R? ? ? ? ? 500 mL? ? ?RUO? ? ? ? ? ? 50~400 mL? ? ? ? ? 550 mL

MAP1000-R? ? ? ? 1000 mL? ?RUO? ? ? ? ? ? 150~1000 mL? ? ?1500 mL

MAP30-G? ? ? ? ? ? 30 mL? ? ? GMP? ? ? ? ? ? 10~25 mL? ? ? ? ? ?36.5 mL

MAP500-G? ? ? ? ? 500 mL? ? GMP? ? ? ? ? ? 50~400 mL? ? ? ? ?550 mL

MAP1000-G? ? ? ? 1000 mL? GMP? ? ? ? ? ?150~1000 mL? ? ?1500 mL

華雅思創(chuàng)生物?專(zhuān)注于提供CGT、分子診斷和先進(jìn)醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品。”買(mǎi)試劑，找華雅”，我們已成為眾多科研機(jī)構(gòu)的優(yōu)選供應(yīng)商。

150 210 10459? ? ? ? ? ? ? ? ? 150 210 10459? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?150 210 10459

ProteanFect是 基于內(nèi)源蛋白納米顆粒的基因遞送系統(tǒng)，其核酸遞送原理包括：核酸藥物與內(nèi)源蛋白自動(dòng)組裝形成納米顆粒（ProteanFect-核酸復(fù)合物），隨后通過(guò)細(xì)胞的主動(dòng)攝入高效進(jìn)入細(xì)胞；進(jìn)入細(xì)胞后，?ProteanFect-核酸復(fù)合物可快速釋放核酸分子；釋放后的核酸在胞內(nèi)行使功能，內(nèi)源蛋白被天然降解。

ProteanFect的核心優(yōu)勢(shì)

–?高效表達(dá)：能夠在多種原代細(xì)胞（如T細(xì)胞、NK細(xì)胞）及細(xì)胞系中實(shí)現(xiàn) 的外源基因遞送與表達(dá)

–?核酸載量高：支持多種核酸分子的共遞送，提升整體轉(zhuǎn)染效率

–?操作簡(jiǎn)單：讓原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染變得像HEK293一樣簡(jiǎn)單

–?適用性廣：廣泛適合于多種原代細(xì)胞和難轉(zhuǎn)細(xì)胞系，且具備線性放大的能力，滿足不同實(shí)驗(yàn)需求

–?安全性高：使用內(nèi)源蛋白，無(wú)免疫原性風(fēng)險(xiǎn)，轉(zhuǎn)染過(guò)程對(duì)細(xì)胞的損傷小

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REGENECYTE是一種源自人類(lèi)臍帶血的異體造血干細(xì)胞療法，用于治療遺傳性、獲得性或由骨髓消融治療引起的造血系統(tǒng)疾病。臍帶血干細(xì)胞因其高度適應(yīng)性和安全性而備受關(guān)注，這些干細(xì)胞在嬰兒出生后安全采集，不會(huì)對(duì)母親或嬰兒造成傷害。REGENECYTE通過(guò)將這些干細(xì)胞移植到患者體內(nèi)，幫助其恢復(fù)造血和免疫功能，臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，76%的患者在42天內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量恢復(fù)到健康水平，血小板和紅細(xì)胞數(shù)量也得到有效恢復(fù)。

然而，干細(xì)胞治療的廣泛應(yīng)用離不開(kāi)高質(zhì)量的存儲(chǔ)和運(yùn)輸解決方案。OriGen CryoStore 25 凍存袋憑借其卓越的性能和創(chuàng)新設(shè)計(jì)，為干細(xì)胞的長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸提供了可靠支持，成為細(xì)胞治療領(lǐng)域的理想選擇。

CryoStore 25：為干細(xì)胞治療保駕護(hù)航

1. 高品質(zhì)材料與設(shè)計(jì)

Origen CryoStore 25 凍存袋采用堅(jiān)固耐用的EVA材料，這種材料已被廣泛應(yīng)用于行業(yè)領(lǐng)先的CryoStore系列凍存袋中，以其卓越的耐用性和穩(wěn)定性著稱(chēng)。CryoStore 25 凍存袋的密封接口和薄膜經(jīng)過(guò)嚴(yán)格測(cè)試，確保在低溫環(huán)境下的密封性和完整性，為干細(xì)胞提供最佳的保存條件。

2. 獨(dú)特的無(wú)針注射口

CryoStore 25 凍存袋配備“N”型管路，包含一個(gè)male luer接口、兩個(gè)female luers接口和一個(gè)無(wú)針注射口。這種無(wú)針設(shè)計(jì)不僅減少了針刺傷的風(fēng)險(xiǎn)，還通過(guò)可擦拭的接口保持樣本的無(wú)菌性，即使在多次操作中也能維持樣本的完整性。

3. 靈活的包裝與定制

CryoStore 25 凍存袋提供多種包裝選擇，包括4袋/包和1袋/包，滿足不同實(shí)驗(yàn)室和臨床需求。此外，Origen還提供定制化服務(wù)，可根據(jù)客戶(hù)的具體需求調(diào)整管路配置，確保產(chǎn)品與您的工作流程完美契合。

4. 符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)

Origen CryoStore 25 凍存袋通過(guò)了CE認(rèn)證、FDA 510(k)許可，并符合ISO 13485:2016和MDSAP認(rèn)證，所有產(chǎn)品均按照GMP指南生產(chǎn)。這些嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確保了CryoStore 25 凍存袋在細(xì)胞治療領(lǐng)域的安全性和可靠性。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 材料與試劑：新鮮小鼠脾臟、PBS緩沖液、無(wú)菌手術(shù)器械（剪刀、鑷子等）、細(xì)胞過(guò)濾器、CD4/CD8磁珠分選試劑（如需純化特定亞型），或陰選的方式去除B細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞的磁珠分選試劑，RPMI-1640培養(yǎng)基，人白介素2，胎牛血清，抗生素（如青霉素-鏈霉素）。
2. 設(shè)備：無(wú)菌操作臺(tái)、離心機(jī)、磁力分選架。

從小鼠脾臟獲取單細(xì)胞懸液

1. 小鼠頸椎脫臼處死，75%乙醇浸泡5分鐘，取出小鼠置于無(wú)菌操作臺(tái)上，左腹側(cè)朝上。
2. 在小鼠左腹側(cè)中部剪開(kāi)小口，撕開(kāi)皮膚暴露腹壁，可見(jiàn)紅色長(zhǎng)條狀脾臟。
3. 在脾臟下側(cè)提起腹膜，剪開(kāi)后上翻，暴露脾臟，用鑷子提起脾臟，眼科剪分離下面的結(jié)締組織，取出脾臟，剝?nèi)ブ車(chē)慕Y(jié)締組織，期間用含有2%FBS的PBS溶液保持脾臟濕潤(rùn)。
4. 將脾臟放于70UM過(guò)濾網(wǎng)中，用注射器針芯輕輕研壓脾臟，用含2%FBS的PBS沖洗過(guò)濾網(wǎng)，獲細(xì)胞懸液。
5. 300G離心5分鐘，收集細(xì)胞沉淀，然后加入紅細(xì)胞裂解液裂解，將紅細(xì)胞充分裂解，收集白細(xì)胞。

從單細(xì)胞懸液中分離小鼠原代T細(xì)胞

1. 全T細(xì)胞分離：利用陰選的方式去除B細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞等，按照分選試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
2. 亞群分離（如需要CD4+或CD8+ T細(xì)胞）：
   • 使用CD4或CD8磁珠（如MACS磁珠）分選獲得特定T細(xì)胞亞群。
   • 將磁珠標(biāo)記的細(xì)胞懸液置于磁性分選裝置中，分離出目標(biāo)T細(xì)胞亞群。

培養(yǎng)與檢測(cè)

1. 將分離的T細(xì)胞重懸于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，并加入抗生素與人白介素2。
2. 細(xì)胞密度一般控制在1-2×10^6 CELLS/ML，放入37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

轉(zhuǎn)染

企業(yè)介紹

02. 細(xì)胞培養(yǎng)與準(zhǔn)備

03. 轉(zhuǎn)染操作

3.1 細(xì)胞準(zhǔn)備

• 提前一天種板，準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞。
• 在96孔板中加入約2.5×10^4細(xì)胞，細(xì)胞過(guò)夜貼壁。
• 待細(xì)胞匯合度為70%-80%時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，用Opti-MEM輕柔清洗細(xì)胞兩次，并加入20 μL Opti-MEM備用。

3.2 配置ProteanFect轉(zhuǎn)染體系

• 在40 μL Reagent A中加入0.5 μg EGFP mRNA，充分混勻。
• 往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混勻。

3.3 轉(zhuǎn)染

• 將上述ProteanFect轉(zhuǎn)染液加入細(xì)胞。
• 37℃培養(yǎng)箱孵育60分鐘。
• 棄轉(zhuǎn)染液（為避免細(xì)胞損失，無(wú)需完全棄盡）。
• 加入200 μL完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，24小時(shí)后檢測(cè)EGFP mRNA表達(dá)，48小時(shí)后檢測(cè)GFP pDNA表達(dá)。

04. 轉(zhuǎn)染檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)原理

• 利用帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體與帶負(fù)電的DNA通過(guò)靜電作用力結(jié)合形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
• 復(fù)合物被細(xì)胞膜表面吸附后通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，在內(nèi)涵體內(nèi)釋放，可能通過(guò)膜融合或內(nèi)吞體破裂等方式將DNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
• 最終DNA通過(guò)細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核，實(shí)現(xiàn)外源基因的表達(dá)。

• 核酸藥物與內(nèi)源蛋白自動(dòng)組裝形成ProteanFect-核酸復(fù)合物。
• 細(xì)胞主動(dòng)攝入ProteanFect-核酸復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞，核酸分子釋放，內(nèi)源蛋白被內(nèi)在降解途徑降解。
• 外源基因表達(dá)。

操作步驟

1. 將核酸與Lipofection Reagent混合形成復(fù)合物。
2. 將復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
3. 經(jīng)過(guò)12-72小時(shí)后進(jìn)行基因表達(dá)檢測(cè)。

1. 制備ProteanFect轉(zhuǎn)染體系。
2. 將ProteanFect轉(zhuǎn)染體系加入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
3. 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型孵育15-120分鐘，最快可在結(jié)束反應(yīng)1小時(shí)后觀察到目的基因的表達(dá)。

適用范圍

• 不適用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞，因?yàn)檫@些細(xì)胞可能對(duì)Lipo轉(zhuǎn)染產(chǎn)生較大毒性，轉(zhuǎn)染效率低，且對(duì)培養(yǎng)條件有特殊要求。

• 適用于多種細(xì)胞系，包括難轉(zhuǎn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞，因?yàn)镻roteanFect具有高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性，且操作簡(jiǎn)便。

企業(yè)介紹

原代T細(xì)胞的分離

原代T細(xì)胞的活化

培養(yǎng)與傳代

• 建議每2天對(duì)T細(xì)胞進(jìn)行傳代，保持細(xì)胞密度在1×10^6/mL。
• 在T細(xì)胞激活后2-10天進(jìn)行轉(zhuǎn)染，最佳轉(zhuǎn)染時(shí)間為激活后4-7天。

轉(zhuǎn)染操作

• 使用Opti-MEM培養(yǎng)基（或無(wú)血清RPMI 1640/無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基）進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
• 推薦使用ProteanFect Max轉(zhuǎn)染試劑，它已被證明在人原代T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高效和持久的基因表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2. CRISPR-Cas9系統(tǒng)簡(jiǎn)介

3. ProteanFect CRISPR Cas9轉(zhuǎn)染機(jī)制

3.1 復(fù)合物形成

• Cas9 mRNA和sgRNA在細(xì)胞外與ProteanFect內(nèi)源蛋白結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

3.2 高效遞送

• 形成的復(fù)合物通過(guò)ProteanFect的高效遞送能力，穿透細(xì)胞膜，將Cas9 mRNA和sgRNA送入細(xì)胞。

3.3 快速釋放

• 一旦進(jìn)入細(xì)胞，ProteanFect-核酸復(fù)合物迅速釋放Cas9 mRNA和sgRNA，準(zhǔn)備進(jìn)行基因編輯。

3.4 翻譯與復(fù)合物形成

• 釋放的Cas9 mRNA在細(xì)胞質(zhì)中被翻譯成Cas9蛋白，同時(shí)sgRNA與Cas9蛋白結(jié)合，形成RNP（核蛋白）復(fù)合物。

3.5 基因組編輯

• RNP復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核，sgRNA引導(dǎo)Cas9蛋白到特定的基因位點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)精確的DNA切割，啟動(dòng)基因編輯過(guò)程。

4. ProteanFect CRISPR Cas9的優(yōu)勢(shì)

• 高轉(zhuǎn)染效率：在多種細(xì)胞系中實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染。
• 低細(xì)胞毒性：減少對(duì)細(xì)胞的潛在傷害，提高實(shí)驗(yàn)的安全性。
• 操作簡(jiǎn)便：簡(jiǎn)化了基因編輯流程，提高了實(shí)驗(yàn)效率。