成人无码AV片在线观看蜜芽,yy1111111少妇无码影院 http://www.h1bg.cn Fri, 12 Sep 2025 08:25:33 +0800 zh-CN hourly 1 https://wordpress.org/?v=4.9.9 PALL 15950-017血清替代物 ,讓您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)輕松無(wú)憂! http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14907.html http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14907.html#respond Wed, 18 Nov 2020 08:26:54 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14907 細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!

市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|(zhì)。并且為節(jié)節(jié)攀高的胎牛血清價(jià)格頭疼不已?還在為時(shí)不時(shí)斷貨而苦惱?還在糾結(jié)用澳洲產(chǎn)血清還是新西蘭源血清?如今,大部分實(shí)驗(yàn)室都還在用胎牛血清或新生牛血清來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,但是隨著全球胎牛血清血源地減少以及胎牛血清價(jià)格的不斷上漲,以及來(lái)自動(dòng)物保護(hù)組織的壓力,很多實(shí)驗(yàn)室尤其是干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室開始嘗試使用血清替代物來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),這種趨勢(shì)從發(fā)達(dá)國(guó)家美國(guó)歐洲開始,他們的實(shí)驗(yàn)室很多都已經(jīng)進(jìn)行了很多年的血清替代物細(xì)胞培養(yǎng)。隨著亞洲尤其是中國(guó)科研經(jīng)費(fèi)的充足以及干細(xì)胞研究的興起,國(guó)內(nèi)的無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)也蔚然成風(fēng)。

2005年首次報(bào)道人血小板裂解物(HPL)可以代替胎牛血清用于MSCs的大規(guī)模培養(yǎng)和制備,能滿足臨床應(yīng)用的需求。

隨后有一系列的文章證明HPL能起到FBS的功能,促進(jìn)MSCs的增殖擴(kuò)增。這種高效的細(xì)胞增殖刺激使MSCs能夠在11-16天的單個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi)進(jìn)行大規(guī)模的臨床應(yīng)用,而不需要進(jìn)一步的傳代,同時(shí)保持基因組的穩(wěn)定性。

Ultroser G 血清替代品(Ultroser G serum substitute),是美國(guó)Pall公司專門針對(duì)生物治療、再生醫(yī)學(xué)、規(guī)?;竸?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等過程中替代胎牛血清FBS研發(fā)而成,由Pall法國(guó)分公司生產(chǎn),原裝進(jìn)口中國(guó)。

Ultroser G血清替代品具有25余年的應(yīng)用歷史,自上市以來(lái),受到歐洲和美國(guó)眾多科研人員的一致認(rèn)可,在NCBI和ELSEVIER可搜索到近1000篇相關(guān)文獻(xiàn)。隨著全球胎牛血清價(jià)格的不斷上漲、干細(xì)胞研究的廣泛開展、以及國(guó)內(nèi)科研經(jīng)費(fèi)的增加,越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室開始使用UltroserG 血清替代品進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

 

選擇pall血清替代品的十大理由
1.完全可以替代胎牛血清,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果更好的重復(fù)性和穩(wěn)定性;

2.美國(guó)上市公司頗爾,國(guó)際生命科學(xué)領(lǐng)導(dǎo)品牌,20多年的產(chǎn)品應(yīng)用歷史,得到美國(guó)和歐洲科學(xué)家的一致認(rèn)可;

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果已經(jīng)得到證明,在主流文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)中可以搜索到上千篇發(fā)表的文獻(xiàn);

4.生物活性是血清的5倍;

5.干粉狀包裝,易儲(chǔ)存;

6.組分的一致性,批次的穩(wěn)定性,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性提高;

7.恒定不變的生物活性;

8.更長(zhǎng)的保質(zhì)期,從生產(chǎn)日期起4年;

9.兼容市場(chǎng)主流細(xì)胞培養(yǎng)基;

10.消除血清帶來(lái)的血紅蛋白,內(nèi)毒素,瘋牛病等潛在不穩(wěn)定因素影響;

 

PALL?15950-017血清替代品原瓶原裝進(jìn)口中國(guó)。PALL血清替代品專門針對(duì)疫苗生產(chǎn)、抗體制備、細(xì)胞治療、規(guī)?;瘎?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)研制而成,具有活性高、批次一致的核心優(yōu)勢(shì)。

PALL?15950-017血清替代品血清替代品屬于半固定成分,相對(duì)于動(dòng)物制品的胎牛血清,具有多方面的產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

 

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PALL 15950-017 血清替代物 20ML

 

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Gibco CTS Dynabeads CD3/CD28 —-分離和激活初始及早期記憶T細(xì)胞 http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14834.html http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14834.html#respond Mon, 16 Nov 2020 02:57:05 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14834 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),使用Gibco CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠可以使初始和早期記憶T細(xì)胞幾乎100%恢復(fù)。這種同時(shí)進(jìn)行T細(xì)胞分離和活化的一步法能夠產(chǎn)生純凈且被均勻活化的T細(xì)胞。用CTS Dynabeads CD3/CD28擴(kuò)增的CD4+和CD8+ T細(xì)胞在第10天維持早期記憶表型并且具有克隆多樣性。早期去除磁珠是可行的并且提高γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠可提供可靠的結(jié)果,已用于80多種臨床試驗(yàn)和商業(yè)T細(xì)胞藥物生產(chǎn)中。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法:

  1. 使用CTS Dynabeads CD3/CD28(磁珠:細(xì)胞比例為3:1)在細(xì)胞培養(yǎng)袋中分離并激活來(lái)自健康供體的PBMC的T細(xì)胞,其中CTS OpTmizer T細(xì)胞擴(kuò)增SFM補(bǔ)充有CTS免疫細(xì)胞血清替代物,Gibco? L-谷氨酰胺和Gibco?慶大霉素(不完全培養(yǎng)基)。
  2. 在移除磁珠后,在細(xì)胞培養(yǎng)板或者細(xì)胞培養(yǎng)袋中擴(kuò)增T細(xì)胞。
  3. 將分離的和活化的T細(xì)胞在完全培養(yǎng)基(不完全培養(yǎng)基加100U/mL IL-2)中擴(kuò)增7–10天;在刺激后第2,3或5天磁性移除CTS Dynabeads CD3/CD28。
  4. 用涂有重組人纖維蛋白試劑的微孔板中的編碼EGFP的γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞。
  5. 使用流式細(xì)胞分析軟件在細(xì)胞分析儀上進(jìn)行T細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)分析。
  6. 使用Invitrogen? Dynabeads? mRNA DIRECT?純化試劑盒分離來(lái)自T細(xì)胞的RNA,并使用Ion AmpliSeq?試劑盒通過TCRβ測(cè)序?qū)ζ溥M(jìn)行分析。

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠不需要上游T細(xì)胞選擇,因?yàn)樵摷夹g(shù)基于CD3和CD28共表達(dá)同時(shí)分離和激活初始和早期記憶T細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示CD3+ CD28+ T細(xì)胞被分離,恢復(fù)率高(>90%)(圖2)。在激活后第3天,細(xì)胞被均勻刺激(>95% CD25+)并具有高純度(>95% CD3+)(圖3)。

 

(CTS Dynabeads CD3/CD28優(yōu)先分離CD3+ CD28+ 細(xì)胞。將PBMC與CTS Dynabeads CD3/CD28以3:1磁珠:細(xì)胞的比例孵育30分鐘,并分析陰性(非分離)級(jí)分并用于計(jì)算分離效率。A代表性細(xì)胞圖,證明CD3+ CD28+ T細(xì)胞分離的效率。B恢復(fù)實(shí)驗(yàn)總結(jié)(n = 9)。)

 

(用CTS Dynabeads CD3/CD28分離的T細(xì)胞被均勻刺激且具有高純度。(A,B)在分析活化標(biāo)記物之前,將分離的T細(xì)胞擴(kuò)增3天。(C,D)在第0天(起始材料)和激活后第3天和第10天分析T細(xì)胞純度。)

 

(T細(xì)胞擴(kuò)增后克隆多樣性增加。用CTS Dynabeads CD3/CD28分離并活化T細(xì)胞。(A)在第0,3和10天,收獲樣品用于TCRβ測(cè)序。(B)在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中,在激活后第3天也用γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞。)

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

  • CTS Dynabeads CD3/CD28分離CD3+ CD28+ T細(xì)胞,效率高,純度高。
  • 分離和活化的CD4+和CD8+ T細(xì)胞在10天內(nèi)擴(kuò)增100至800倍,同時(shí)保留年輕表型(CD45RA+/- CD127+/- CD62L+ PD-1-)。
  • 基于TCRβ測(cè)序,擴(kuò)增的T細(xì)胞具有增加的克隆多樣性。
  • 第2天去除磁珠提高了γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

 

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Gibco?? ? ? ? ? ? ? ? ? ??11161D? ? ? ? ? ? ? ? Dynabeads? Human T-Activator CD3/CD28 for T Cell Expansion and Activation

BioGems? ? ? ? ? ? ? ? ?05121-25? ? ? ? ? ? ?Anti-Human CD3 SAFIRE Purified

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WGA 技術(shù) DOP-PCR, MDA , MALBAC 到底如何選擇,滿滿干貨來(lái)啦! http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14809.html http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14809.html#respond Wed, 11 Nov 2020 09:02:09 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14809 單細(xì)胞全基因組測(cè)序技術(shù)是在單細(xì)胞水平對(duì)全基因組進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序的一項(xiàng)技術(shù)。

原理對(duì)分離的單個(gè)細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得高覆蓋率的完整的基因組后進(jìn)行高通量測(cè)序,廣泛應(yīng)用于癌癥研究、胚胎發(fā)育、輔助生殖、細(xì)胞分化、免疫機(jī)制、微生物等方向的研究。

獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物是準(zhǔn)確全面的測(cè)序結(jié)果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無(wú)偏好性的擴(kuò)增,在單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)誕生的近二十年時(shí)間里,全基因組擴(kuò)增技術(shù)經(jīng)歷了幾次重大的變革。

WGA主要有三種方式:DOP-PCR,MDA,MALBAC。

 

 

下面小編就來(lái)為大家介紹一下WGA技術(shù)的演變歷程,以及怎樣根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇相應(yīng)的擴(kuò)增方式。

DOP-PCR (Degenerate Oligonucleotide–Primed Polymerase Chain Reaction)

技術(shù)原理:簡(jiǎn)并寡核苷酸引物PCR,引物的3′?含6bp的隨機(jī)序列,可以隨機(jī)的和基因組DNA結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)全基因組的擴(kuò)增。

應(yīng)用范圍:因?yàn)镻CR的指數(shù)擴(kuò)增特性,放大了基因組上不同序列之間的差異,因而導(dǎo)致擴(kuò)增出的基因組覆蓋度較低。盡管如此,在1M bin size的水平上,DOP-PCR適合對(duì)染色體的CNV進(jìn)行定量。

商品化試劑盒:Sigma-Aldrich, GenomePlex Single Cell Whole Genome Amplification Kit。

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? MDA (Multiple Displacement Amplification)

技術(shù)原理:2001年由Laskin團(tuán)隊(duì)發(fā)明,使用隨機(jī)的六聚體引物和φ29DNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng),該聚合酶具有很強(qiáng)的鏈置換特性,能夠在等溫的條件下,擴(kuò)增產(chǎn)生50~100kb的核酸片段。同時(shí)由于其3’-5’核酸外切酶活性和校對(duì)活性,φ29 DNA聚合酶具有很高的復(fù)制保真性。應(yīng)用范圍:MDA法比DOP-PCR擁有更高的基因組覆蓋度,φ29 DNA聚合酶的高效率及高保真性,使得MDA法在對(duì)SNV的分析,以及構(gòu)建大片段文庫(kù)上有著顯著優(yōu)勢(shì)。但是,和DOP-PCR相同,MDA法依然是指數(shù)擴(kuò)增,因此依然存在PCR反應(yīng)的序列偏好性,然而,和DOP-PCR不同的是,這種偏好性并不能重復(fù),因此MDA法不適合進(jìn)行CNV的分析。

 

 

商品化試劑盒:Qiagen,?REPLI-g?Single?Cell?Kit。?

 

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? MALBAC (Multiple Annealing and Looping–Based Amplification Cycles)

技術(shù)原理:2012年由謝曉亮團(tuán)隊(duì)發(fā)明,擬線性的擴(kuò)增過程降低了指數(shù)擴(kuò)增的序列偏好性。擴(kuò)增引物的5’含有27bp的共同序列,3’是8bp的隨機(jī)序列,可以和模板在15~20℃的低溫下結(jié)合,經(jīng)過8~12個(gè)循環(huán)的擬線性擴(kuò)增后,再對(duì)這些環(huán)狀的擴(kuò)增子進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增。應(yīng)用范圍:MALBAC法的優(yōu)勢(shì)在于,雖然它依然存在一定的序列偏好性,但和MDA不同,MALBAC的這種偏好性在不同的細(xì)胞之間是可重復(fù)的,因此可以通過對(duì)參考細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)化后,進(jìn)行CNV的分析;另外,由于其擴(kuò)增的均一性,MALBAC法擴(kuò)增的等位基因敲除率更低。MALBAC的弱點(diǎn)在于,它使用的聚合酶保真性不如φ29,因此MALBAC在檢測(cè)SNV時(shí)將會(huì)出現(xiàn)更多的假陽(yáng)性;另外,由于它可重復(fù)性的序列偏好性,基因組上低擴(kuò)增的區(qū)域有時(shí)會(huì)在擴(kuò)增過程中丟失。

 

 

商品化試劑盒:Yikon, Single Cell Whole Genome Amplification Kit; Rubicon, PicoPLEX WGA Kit。

 

 

 

由上述的分析可見,MDA和MALBAC各有優(yōu)劣,實(shí)際上在不同的文獻(xiàn)中,研究者也會(huì)根據(jù)研究目的的不同,采取不同的方式對(duì)基因組進(jìn)行擴(kuò)增,以滿足研究的需要。

PicoPLEX??WGA Kit:用于單細(xì)胞文庫(kù)構(gòu)建的全基因組擴(kuò)增解決方案

PicoPLEX??DNA-seq Kit:單細(xì)胞 DNA 文庫(kù)制備技術(shù),適用于 Illumina 所有 NGS 測(cè)序平臺(tái)

ThurPLEX??DNA-seq Kit:更高的通量, 更好的性能, 用于所有 Illumina 的 NGS 平臺(tái)

 

更多產(chǎn)品歡迎咨詢!

品牌 貨號(hào) 名稱 規(guī)格
Rubicon R300381 PicoPLEX DNA-seq Kit 48
Rubicon R300672 SMARTer? PicoPLEX? Single Cell WGA Kit 96
Rubicon R300722 PicoPLEX Single Cell WGA Kit v3 96
Rubicon R400407 ThruPLEX DNA-seq 96D Kit 96

 

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全球與中國(guó)干細(xì)胞專利發(fā)展態(tài)勢(shì)對(duì)比分析 http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14797.html http://www.h1bg.cn/%e5%a4%b4%e6%9d%a1/14797.html#respond Wed, 11 Nov 2020 08:36:57 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14797 干細(xì)胞(stem cell)是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞,可以作為治療糖尿病、心血管病、骨關(guān)節(jié)炎、腫瘤等人類疾病的模型,被醫(yī)學(xué)界稱為“萬(wàn)能細(xì)胞”,廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)、細(xì)胞替代治療及藥物篩選等研究領(lǐng)域。近幾年,我國(guó)也加大干細(xì)胞的研究,并出臺(tái)了相關(guān)的政策規(guī)范。

全球和中國(guó)干細(xì)胞總體趨勢(shì)對(duì)比分析

隨著申請(qǐng)量的上升,授權(quán)量也 相應(yīng)上升,但授權(quán)率近年來(lái)沒有太大波動(dòng),基本維持 在30%—40%之間細(xì)胞技術(shù)越來(lái)越受到重視,目前已進(jìn)入快速生長(zhǎng)期。此外,中國(guó)干細(xì)胞的授權(quán)率基本維持在40%—50%之間,高于全球10個(gè)百分點(diǎn)。

全球(左)和中國(guó)(右)專利技術(shù)

從圖中全球干細(xì)胞技術(shù)生命周期分析中可以看出,干細(xì)胞技術(shù)一直處于線性上升趨勢(shì),平均斜率為2.7左右,說明干細(xì)胞技術(shù)現(xiàn)在仍處于發(fā)展階段,2001年之前的20年生長(zhǎng)緩慢, 2001年之后的20年快速增長(zhǎng),這與全球干細(xì)胞總體趨勢(shì)一致。

全球干細(xì)胞申請(qǐng)量位居前二十位的國(guó)家/地區(qū),對(duì)干細(xì)胞的地域分布情況進(jìn)行分析。

 

各國(guó)家/地區(qū)的申請(qǐng)來(lái)看,美國(guó)申請(qǐng)5 418件居首位,研究機(jī)構(gòu)及私人企業(yè)的重點(diǎn)研發(fā),使其成為全球干細(xì)胞的領(lǐng)導(dǎo)者;中國(guó)和世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織緊隨其后,分別為4 843件和4 094件,中國(guó)政府近幾年加大了干細(xì)胞的研究投入,并將其納入“十三五”國(guó)家規(guī)劃和“健康中國(guó)2030”綱要;歐洲專利局、日本和韓國(guó)位列第三、第四和第五,日本的京都大學(xué)和韓國(guó)的首爾國(guó)立大學(xué)在干細(xì)胞技術(shù)研究上投入較大,并取得了豐碩的成果。

 

全球和中國(guó)干細(xì)胞主要競(jìng)爭(zhēng)者

從全球近十年獲得干細(xì)胞發(fā)明專利授權(quán)的機(jī)構(gòu)中選取前十位,如圖。從機(jī)構(gòu)性質(zhì)上看,7家為科研院校,3家為上市公司;從國(guó)家分布上看,美國(guó)占7名,日本、韓國(guó)、中國(guó)各占1名??傮w來(lái)說,各機(jī)構(gòu)的授權(quán)量都呈上升趨勢(shì)。

 

 

 

 

 

總體來(lái)看,近十年全球和中國(guó)都重點(diǎn)關(guān)注間充質(zhì)干細(xì)胞和多能干細(xì)胞,包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等,不同點(diǎn)是全球還關(guān)注造血干細(xì)胞和干細(xì)胞制藥,中國(guó)關(guān)注神經(jīng)干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞等。對(duì)比前五年(2008—2012年)與后五年(2013—2017年),全球關(guān)于核酸下降,生長(zhǎng)因子和造血干細(xì)胞上升,中國(guó)關(guān)于多能干細(xì)胞和干細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)液下降,生長(zhǎng)因子上升。

 

 

專家提出的意見
干細(xì)胞專利申請(qǐng)經(jīng)過了潛伏 期和萌芽期,目前處于快速生長(zhǎng)階段,但中國(guó)晚于全球10年左右。

?從地區(qū)分布來(lái)看,美國(guó)居首位,中國(guó)、日本、韓國(guó)次之。相對(duì)于全球,國(guó)內(nèi)申請(qǐng)較為分散,核心專利權(quán)人與一般專利權(quán)人差距未拉開。3.對(duì)比前后五年,干細(xì)胞專利申請(qǐng)應(yīng)用范圍更加廣泛,分類更加精細(xì),但中國(guó)IPC的絕對(duì)數(shù)量和標(biāo)題詞數(shù)量大概只是全球的一半,仍有許多技術(shù)空白點(diǎn)和研究發(fā)展空間。

中國(guó)關(guān)注神經(jīng)干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞,且近五年的研究重點(diǎn)增加了抗腫瘤藥和治療傷口、潰瘍、燒傷、疤痕、疙瘩等藥物,說明中國(guó)干細(xì)胞研究方向逐漸偏向抗腫瘤和創(chuàng)傷整形等方面。全球?qū)υ煅杉?xì)胞和干細(xì)胞制藥研究較多,但中國(guó)在此方面相對(duì)較少,今后可加大該方面的研究。

 

 

說了那么多,小編給大家推薦一波干細(xì)胞研究產(chǎn)品,干細(xì)胞藥企推薦哦!

品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品信息
HY STEMCELL HX0201M CCGmHuMTM人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基,成分確定、無(wú)血清、無(wú)異源物
Corning 88-600-CV MSC xeno-free SFM
Lifeline LL-0062 骨髓MSC完全培養(yǎng)基套裝
Lifeline LL-0034 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
Lifeline LL-0073 NSC+纖連
蛋白 細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
Lifeline ?LL-0070 NSC 培養(yǎng)基套裝
Lifeline LL-0062 骨髓MSC完全培養(yǎng)基套裝
Lifeline LL-0034 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基套裝
LONZA BEBP12-725F UltraCULTURE Serum-free Medium無(wú)血清培養(yǎng)基,比利時(shí)

 

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? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?華雅思創(chuàng)生物

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一粒肉醬竟然引發(fā)這么嚴(yán)重后果!你不注意會(huì)后悔! http://www.h1bg.cn/%e5%88%86%e6%9e%90%e8%af%84%e8%ae%ba/14494.html http://www.h1bg.cn/%e5%88%86%e6%9e%90%e8%af%84%e8%ae%ba/14494.html#respond Mon, 27 Apr 2020 07:19:43 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14494

近日,某醫(yī)院有一老年病例,因吃炸醬面時(shí)不小心吸入了一粒肉醬后幾天開始發(fā)燒,咳嗽,呼吸困難入院,導(dǎo)致吸入性肺炎!后來(lái)經(jīng)過檢測(cè)治療發(fā)現(xiàn)為金黃色葡萄球菌肺炎,其痰培養(yǎng)示金黃色葡萄球菌證實(shí)吸入性金黃色葡萄球菌肺炎診斷??磥?lái)是患者在進(jìn)食時(shí)吸入了一粒帶有金黃色葡萄球菌的肉醬,而引發(fā)的肺炎!

什么一粒肉醬竟會(huì)導(dǎo)致這么嚴(yán)重的后果?什么是金黃色葡萄球菌?

金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人類的一種重要病原菌,隸屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus),有”嗜肉菌”的別稱,是革蘭氏陽(yáng)性菌的代表,可引起許多嚴(yán)重感染。而對(duì)于金黃色葡萄球菌在速凍食品中的存在量,衛(wèi)生部于2011年11月24日公布食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《速凍面米制品》,允許金葡菌限量存在。

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一種具有較強(qiáng)攻擊性的常見人類病原菌,隸屬于葡萄球菌屬,可引起多種醫(yī)院感染和社區(qū)感染性疾病,輕者引起化膿性皮膚感染,嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致各種危及生命的并發(fā)癥,如菌血癥和心內(nèi)膜炎。金黃色葡萄球菌在環(huán)境中分布廣泛,對(duì)外界不利環(huán)境如干燥、低溫等有較強(qiáng)的抵抗能力,極易通過各種途徑污染食品,會(huì)引發(fā)金黃色葡萄球菌食物中毒(S.aureus food poisoning,SFP),對(duì)食品安全和人類健康造成重大威脅。當(dāng)金黃色葡萄球菌污染食品后,會(huì)在適宜的環(huán)境條件下大量繁殖,與此同時(shí)分泌各種毒素或毒力因子,如金黃色葡萄球菌腸毒素(Staphylococcal enterotoxins,SE),大大增加了其侵襲性和致病力。

根據(jù)美國(guó)疾病預(yù)防控制中心的研究報(bào)道,每年在美國(guó)由金黃色葡萄球菌導(dǎo)致的食物中毒約有24萬(wàn)人次,其中1000多人需要住院治療并約10人因此死亡,由該菌引起的食物中毒占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒的33%;在加拿大,這個(gè)比例高達(dá)45%同。我國(guó)每年也會(huì)發(fā)生多起該類食品安全事件,給醫(yī)療衛(wèi)生造成巨大壓力。

金黃色葡萄球菌感染危害

當(dāng)身體被金黃色葡萄球菌感染的時(shí)候,體內(nèi)的白細(xì)胞會(huì)有所下降,從而導(dǎo)致機(jī)體的抵抗力下降,增加患病的風(fēng)險(xiǎn)。

當(dāng)天氣炎熱的時(shí)候,食物易發(fā)生變質(zhì),產(chǎn)生大量的金黃色葡萄球菌,從而引起金黃色葡萄球菌感染癥狀,導(dǎo)致出現(xiàn)食物中毒的現(xiàn)象,引起機(jī)體產(chǎn)生一些惡心、嘔吐、頭暈等食物中毒反應(yīng),嚴(yán)重的可能會(huì)出現(xiàn)暈厥的現(xiàn)象。

金黃色葡萄球菌對(duì)皮膚也會(huì)造成傷害,引起皮膚出現(xiàn)潰爛化膿的現(xiàn)象,如果傷口處被金黃色葡萄球菌感染,會(huì)使傷口擴(kuò)散,加重病情,延長(zhǎng)傷口的愈合時(shí)間,身體出現(xiàn)嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),引起發(fā)熱,惡心等現(xiàn)象。如果血液中含有金黃色葡萄球菌,經(jīng)過大腦后,嚴(yán)重會(huì)引起腦膜炎,輕者出現(xiàn)頭痛、發(fā)熱、惡心嘔吐等不適癥狀,重者還會(huì)出現(xiàn)休克的現(xiàn)象,需要立即搶救才可以。

另外,金黃色葡萄球菌感染后還可能會(huì)出現(xiàn)其它方面的疾病,比如引起腸炎、肺炎、心內(nèi)膜炎等,還可能會(huì)引起中毒性的休克、敗血癥等嚴(yán)重后果,因此,大家日常需要注意做好個(gè)人的衛(wèi)生工作,勤加鍛煉,提高身體的免疫力和抵抗能力。

相關(guān)事件

北京市工商局2011年10月19日查出思念牌的三鮮水餃含有金黃色葡萄球菌。

新快報(bào)2011年11月4日?qǐng)?bào)道,廣州市工商局公布2011年第三季度三類食品質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果,“三全”以及“海霸王”的三款速凍食品也都被驗(yàn)出含有金黃色葡萄球菌,分別是“三全灌湯水餃(豬肉玉米蔬菜)”、“三全灌湯水餃(三鮮)”以及“海霸王經(jīng)典包心魚丸”。

2012年1月,媒體報(bào)道,爺爺因親吻三代單傳的孫子致其感染金黃色葡萄球菌而得敗血癥,最終不治死亡。

控制方法

金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測(cè)主要有動(dòng)物試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附等方法。

防止帶菌人群對(duì)各種食物的污染,需要定期對(duì)生產(chǎn)加工人員進(jìn)行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時(shí)停止其工作或調(diào)換崗位。

防止金黃色葡萄球菌對(duì)奶及其制品的污染,牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房,不能擠用患化膿性乳腺炎乳牛的牛奶;奶擠出后,要迅速冷至-10℃以下,以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料,注意低溫保存。對(duì)肉制品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位,經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)。

防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成,應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6h,并且食用前要徹底加熱。

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高通量測(cè)序解決方案助力新冠病毒研究 http://www.h1bg.cn/%e9%94%80%e5%94%ae%e8%81%94%e7%9b%9f/14488.html http://www.h1bg.cn/%e9%94%80%e5%94%ae%e8%81%94%e7%9b%9f/14488.html#respond Sun, 26 Apr 2020 02:55:14 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14488  

2019年底突如其來(lái)的新型冠狀病毒,讓我們?cè)俅握J(rèn)識(shí)到了廣泛分布且種類繁多的病原微生物對(duì)人類的威脅。面對(duì)一場(chǎng)突如其來(lái)的疫情,既要采用科學(xué)的手段快速發(fā)現(xiàn)并認(rèn)識(shí)病原微生物,同時(shí)也要基于科學(xué)的認(rèn)識(shí)制定可行的臨床檢測(cè)和治療方案。新興的高通量基因測(cè)序技術(shù)通過直接對(duì)病毒基因組進(jìn)行全面分析,對(duì)于2019-nCoV的首先確認(rèn)、動(dòng)態(tài)分析、進(jìn)化來(lái)源以及致病機(jī)制、傳播途徑研究等具備了無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì)。

作為分子生物學(xué)領(lǐng)域的行業(yè)領(lǐng)導(dǎo)者,QIAGEN旗下多款經(jīng)典病毒核酸純化試劑盒就以其回收率高、核酸純度高、多樣本兼容性的優(yōu)勢(shì)在2019-nCoV實(shí)驗(yàn)檢測(cè)環(huán)節(jié)中 做好準(zhǔn)備。同時(shí)QIAGEN提供了基于不同技術(shù)和方法的檢測(cè)方案,包括高通量測(cè)序技術(shù)方案。

 

 

除了新型冠狀病毒外,近年來(lái)造成人類感染的病原微生物也日益復(fù)雜,同時(shí)抗菌藥物濫用與細(xì)菌耐藥已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn)。如今,高通量測(cè)序已經(jīng)迅速成為臨床實(shí)驗(yàn)室的重要檢測(cè)平臺(tái),延展并提高了經(jīng)典微生物方法的檢測(cè)能力,

 

病毒核酸全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增

實(shí)際的檢測(cè)過程中可能拿到的并非都是最佳樣本,如來(lái)自上呼吸道的咽拭子就因其自身病毒含量低而極易造成檢測(cè)假陰性。面對(duì)這樣的現(xiàn)實(shí)困境,我們?cè)谔岣吆怂岙a(chǎn)量、質(zhì)量的同時(shí),也可以借助 “全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增技(WTA)”技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行均等的放大,解決樣本量不足的難題。

基于QIAGEN充分優(yōu)化改良的 “多重置換擴(kuò)增(MDA)”技術(shù),REPLI-g WTA Single Cell能夠針對(duì)單個(gè)細(xì)胞或pg級(jí)純化RNA進(jìn)行快速的全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增。區(qū)別于傳統(tǒng)PCR類擴(kuò)增方法,REPLI-g可在等溫條件下進(jìn)行均等、高保真的高靈敏度擴(kuò)增,雙鏈cDNA產(chǎn)物非常適用于下游進(jìn)行高通量測(cè)序(二代或三代測(cè)序)、PCR等方法檢測(cè),也多次被運(yùn)用于類似疫情的檢測(cè)方案中,如在2014年西非埃博拉病毒以及2016年中國(guó)南方的寨卡病毒疫情方案中,來(lái)自中國(guó)疾控中心、廣東省疾控中心等單位的研究人員就已將REPLI-g應(yīng)用在對(duì)抗疫情的實(shí)戰(zhàn)中。

人源等宿主rRNA去除

疫情檢測(cè)所采用的樣本絕大多數(shù)來(lái)自呼吸道、血液等,純化后的核酸產(chǎn)物中還存在著大量的人源RNA,占用大量數(shù)據(jù)的同時(shí)還會(huì)對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生潛在影響。通過對(duì)測(cè)序的結(jié)果進(jìn)行分析,我們可看到人源rRNA序列占比極高,因此我們可以通過去除人源rRNA等手段來(lái)部分解決這一問題。此時(shí),又到了QIAseq FastSelect展現(xiàn)其真正實(shí)力的時(shí)候了!

借助獨(dú)特的“黑科技”,僅需通過簡(jiǎn)單的1步加樣以及一段程序性降溫孵育,無(wú)需任何純化步驟,便能在14分鐘內(nèi)完成樣品中人源或其他哺乳動(dòng)物來(lái)源rRNA的高效去除。這一過程可與REPLI-g WTA Single Cell Kit以及幾乎所有其他的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、RNA建庫(kù)試劑盒相兼容,在避免因多步純化而造成病毒核酸損失的同時(shí),還可極為快速地完成rRNA去除這一限速步驟。此外,如果在糞便、肛拭子等樣本中存在較多的細(xì)菌組分,我們也同樣可以利用QIAseq FastSelect 5S/16S/23S Kit結(jié)合QIAseq FastSelect HMR Kit在一步流程中同時(shí)完成全部細(xì)菌和宿主rRNA的去除,十分便捷。

產(chǎn)品名稱 ?????????貨號(hào)

QIAseq FastSelect -rRNA & -Globin HMR Kit???334386

NGS文庫(kù)構(gòu)建

在完成rRNA去除并對(duì)RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(含二鏈合成)后,一款高效的建庫(kù)試劑盒是完成cDNA樣品文庫(kù)構(gòu)建的測(cè)序前關(guān)鍵步驟。KAPA?KK8514 DNA HyperPlus文庫(kù)構(gòu)建試劑盒

貨號(hào):KK8514,整合了DNA酶切片段化及文庫(kù)構(gòu)建步驟,所有反應(yīng)均在一管中完成。酶切片段化可以降低DNA末端損傷,尤其對(duì)于FFPE DNA更是如此。

 

 

貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格

KK8514 KAPA DNA HyperPlus?文庫(kù)構(gòu)建試劑盒,含擴(kuò)增 96?次

KK8512 KAPA DNA HyperPlus?文庫(kù)構(gòu)建試劑盒,含擴(kuò)增 24次

KK8513 KAPA DNA HyperPlus?文庫(kù)構(gòu)建試劑盒,PCR-Free 24?次

KK8515 KAPA DNA HyperPlus?文庫(kù)構(gòu)建試劑盒,PCR-Free 96?次

 

過去幾周來(lái)自中國(guó)疾控等單位的科學(xué)家在其研究中也分別采用了QIAGEN樣本制備(QIAamp Viral RNA Mini Kit,貨號(hào):52904)等解決方案進(jìn)行了冠狀病毒的測(cè)序和基因組分析并相繼發(fā)表在國(guó)際頂尖雜志上。

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CIK細(xì)胞治療技術(shù) http://www.h1bg.cn/%e9%94%80%e5%94%ae%e8%81%94%e7%9b%9f/14443.html http://www.h1bg.cn/%e9%94%80%e5%94%ae%e8%81%94%e7%9b%9f/14443.html#respond Wed, 18 Mar 2020 03:02:29 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14443 CIK細(xì)胞簡(jiǎn)介
??? 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokine-induced killer,CIK)細(xì)胞,是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子(如抗CD3單克隆抗體、IL-2和IFN-γ等)共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。由于主要效應(yīng)細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD3和CD56兩種膜蛋白分子,故又被稱為NK細(xì)胞樣T淋巴細(xì)胞,兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非 MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)。因此,CIK細(xì)胞被認(rèn)為是新一代抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療的方案。

CIK細(xì)胞中的效應(yīng)細(xì)胞CD3+CD56+細(xì)胞在正常人外周血中極其罕見,僅1%~5%,在體外經(jīng)多因子培養(yǎng)28~30天,CD3+CD56+細(xì)胞迅速增多,較培養(yǎng)前升幅可達(dá)1000倍以上。實(shí)驗(yàn)證明,擴(kuò)增出的CD3+CD56+細(xì)胞來(lái)源于外周血中的CD3+CD56-T細(xì)胞和CD4-CD8+T細(xì)胞,而非CD3-CD56+NK細(xì)胞。比較CD3+CD56+CIK細(xì)胞中表達(dá)CD8+和CD8-的兩群細(xì)胞其殺瘤活性沒有顯著性差異,提示CIK細(xì)胞的細(xì)胞毒性與CD3CD56表達(dá)成相關(guān)趨勢(shì),而與CD8的表達(dá)未表現(xiàn)出相關(guān)性。

CIK細(xì)胞治療殺傷原理

??? CIK細(xì)胞能夠通過三種途徑殺滅腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞:

CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的直接殺傷:CIK細(xì)胞可以通過不同的機(jī)制識(shí)別腫瘤細(xì)胞,釋放顆粒酶/穿孔素等毒性顆粒,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解。

CIK細(xì)胞釋放的大量炎性細(xì)胞因子具有抑瘤殺瘤活性:體外培養(yǎng)的CIK細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子,如IFN-γ、TNF-α、IL-2等,不僅對(duì)腫瘤細(xì)胞有直接抑制作用,還可通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)反應(yīng)間接殺傷腫瘤細(xì)胞。

CIK細(xì)胞能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡:CIK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中表達(dá)FasL(Ⅱ型跨膜糖蛋白)通過與腫瘤細(xì)胞膜表達(dá)的Fas(Ⅰ型跨膜糖蛋白)結(jié)合,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

CIK細(xì)胞治療殺瘤特點(diǎn)

1.?增殖速度快? 

CIK細(xì)胞在培養(yǎng)過程中加入多種細(xì)胞因子后,細(xì)胞增殖速度迅速加快,在培養(yǎng)第22天增殖曲線達(dá)頂峰,其中CD3+CD56+細(xì)胞不僅數(shù)量增加1000倍以上,且所占百分比也大幅上升,培養(yǎng)至28~30天時(shí)達(dá)平臺(tái)期,細(xì)胞毒活性亦達(dá)峰值。

2.殺瘤活性高?  

CIK細(xì)胞是以CD3+CD56+T細(xì)胞為主的異質(zhì)細(xì)胞群,大量體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)CIK細(xì)胞較以NK細(xì)胞為主的LAK細(xì)胞具備更強(qiáng)大的殺瘤活性,而且其體內(nèi)殺瘤細(xì)胞毒性的維持不必依賴大劑量外源性IL-2的持續(xù)給予。體外實(shí)驗(yàn)表明CIK細(xì)胞殺傷效率更高。

3.殺瘤譜廣?

CIK細(xì)胞因沒有T淋巴細(xì)胞殺傷時(shí)的MHC限制性,故對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞系(包括K562、Hela、HL60、OCRF-CEM等)和新鮮腫瘤組織均表現(xiàn)出強(qiáng)大的殺傷活性。

4.?對(duì)多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感

CIK細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感的親本細(xì)胞和不敏感的轉(zhuǎn)化細(xì)胞均具有強(qiáng)大的殺傷活性,兩者比較無(wú)差別。

5.?殺瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制劑的影響

Mehta觀察到免疫抑制劑CsA和FK506雖然可以抑制抗CD3單抗介導(dǎo)的CIK細(xì)胞脫顆粒過程,卻不影響靶細(xì)胞誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞脫顆粒,并且CIK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷活性不會(huì)因此降低

6.?對(duì)正常骨髓造血前體細(xì)胞毒性很小

實(shí)驗(yàn)證實(shí)CIK細(xì)胞對(duì)正常髓系克隆生成幾乎沒有影響。

7.?能抵抗腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡

CIK細(xì)胞治療適應(yīng)癥

?

CIK細(xì)胞治療屬于過繼細(xì)胞免疫療法,由于CIK細(xì)胞溶瘤作用是非MHC限制性的,即不受腫瘤組織類型的限制,因此對(duì)任何一種腫瘤均有殺傷作用,但對(duì)高抗原表達(dá)的癌癥療效最好,如:髓性白血病、黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、轉(zhuǎn)移性腎癌、非何杰金氏淋巴瘤等。其它癌癥如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、大腸癌等,CIK細(xì)胞治療亦有較好的療效。CIK細(xì)胞治療適用于任何一期的癌癥患者,但對(duì)早期腫瘤患者或經(jīng)過手術(shù)及放化療后腫瘤負(fù)荷較小的患者效果好。它對(duì)于手術(shù)、放化療或造血干細(xì)胞移植后患者體內(nèi)微小殘留病灶的清除,防止癌細(xì)胞擴(kuò)散和復(fù)發(fā),提高患者自身免疫力,減少毒性反應(yīng)等方面具有重要作用。某些不適合手術(shù)、不能耐受放化療的中晚期腫瘤患者,CIK細(xì)胞治療可以提高其生活質(zhì)量,延長(zhǎng)帶瘤生存時(shí)間。

CIK細(xì)胞治療有效期

CIK細(xì)胞通過直接殺傷、分泌多種細(xì)胞因子等直接抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等途徑起到治療作用。大多數(shù)執(zhí)行殺傷功能的細(xì)胞在回輸后立即執(zhí)行其功能,半衰期約2周至一個(gè)月。回輸?shù)募?xì)胞中包括一部分記憶細(xì)胞,可存活幾年至幾十年,當(dāng)遇到相應(yīng)刺激后,迅速在體內(nèi)活化,殺傷靶細(xì)胞。所以CIK細(xì)胞治療的療程間隔原則上為一個(gè)月,建議首先間隔一個(gè)月連續(xù)做三個(gè)療程,以后每半年做一個(gè)療程。

 

CIK細(xì)胞治療應(yīng)用廣泛,推薦給大家Peprotech一些好用的鑒定產(chǎn)品:

 

產(chǎn)品貨號(hào)??產(chǎn)品名稱

05111-20?Anti-Human CD3 Purified

10113-25?Anti-Rat CD8b SAFIRE Purified

06611-20?Anti-Human CD54 (ICAM-1) Purified

06121-20?Anti-Human CD4 Purified

84421-20?Anti-Human TNF-alpha Purified

96-200-02 Human IL-2

900-k21 ?Human IL-10 ELISA? Kit

900-k96 ??Human IL-12 ELISA Kit

900-k13Human IL-3? ELISA Kit

900-k11 ?Human IL-1α?ELISA? Kit

900-k95 ??Human IL-1β?ELISA? Kit

900-k05?Human EGF ELISA? Kit

900-k27 ??Human IFN-γ?ELISA? Kit

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這么火的NK細(xì)胞治療你了解嗎? http://www.h1bg.cn/%e6%96%b0%e6%89%8b%e4%b8%8a%e8%b7%af/14439.html http://www.h1bg.cn/%e6%96%b0%e6%89%8b%e4%b8%8a%e8%b7%af/14439.html#respond Wed, 18 Mar 2020 02:59:24 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14439 NK細(xì)胞簡(jiǎn)介

??? 自然殺傷細(xì)胞(NK cell, Natural killer cell)是一種細(xì)胞質(zhì)中具有大顆粒的細(xì)?胞,也稱NK細(xì)胞,由骨髓細(xì)胞發(fā)育而成。因?yàn)槠浞菍R恍缘募?xì)胞毒殺作用而被命名。NK細(xì)胞主要分布于外周血中,占外周血單核細(xì)胞(PBMC)的5%~10%,淋巴結(jié)和骨髓中也存在NK細(xì)胞,水平較外周血低,但它可以消滅許多種病源體及多種腫瘤細(xì)胞。自然殺傷細(xì)胞會(huì)直接和陌生細(xì)胞接觸,并以細(xì)胞膜?破裂之方式殺死此細(xì)胞,可利用分泌穿孔素及腫瘤壞死因子,摧毀目標(biāo)細(xì)胞。目前研究認(rèn)為NK細(xì)胞特異性表達(dá)CD56,而缺乏T細(xì)胞抗原CD3。一般認(rèn)為在PBMC中分選到CD3- / CD56+的細(xì)胞即為NK細(xì)胞。

??? NK細(xì)胞屬于粒狀淋巴細(xì)胞,是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分,也是機(jī)體抗御感染和防止細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。它對(duì)靶細(xì)胞殺傷時(shí)既不需特異性抗體參加,也不需抗原預(yù)先致敏。卻能立即發(fā)揮非特異性殺傷靶細(xì)胞的作用,尤其是對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有迅速殺傷和溶解作用。因此,NK細(xì)胞對(duì)癌癥的監(jiān)視作用和抵抗功能已越來(lái)越受到重視。

NK細(xì)胞的活化

??? NK細(xì)胞可通過多種途徑被活化,包括細(xì)胞膜表面的CD2、CD3分子和多種細(xì)胞因子。

????1.?通過CD3分子的ζ鏈

??? NK細(xì)胞不表達(dá)TCR/CD3復(fù)合物,但部分NK細(xì)胞表達(dá)CD3ζ鏈,當(dāng)用CD16抗體刺激NK細(xì)胞活化時(shí),ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化,引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高,IP3水平增加,促進(jìn)細(xì)胞因子合成和ADCC作用。

????2.?通過CD2分子

??? CD2與CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK細(xì)胞,CD3 ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化。

????3.?自然殺傷細(xì)胞刺激因子

??? 自然殺傷細(xì)胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor, NKSF)對(duì)NK細(xì)胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin, LR)?對(duì)NK細(xì)胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用,?體外培養(yǎng)時(shí)加入上述細(xì)胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。

??

NK細(xì)胞的功能

??? 1. 自然殺傷活性,NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制,不依賴抗體,可以直接通過分泌釋放穿孔素、顆粒酶、NK細(xì)胞毒性因子、TNF-α和TNF-β等對(duì)病毒感染的細(xì)胞、白血病細(xì)胞以及其他腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒活性,從而殺傷或者裂解靶細(xì)胞;

2. 抗病毒感染,NK可選擇性地殺傷病毒感染的靶細(xì)胞。由輔佐細(xì)胞或NK細(xì)胞所產(chǎn)生的IFN可協(xié)同NK的抗病毒作用,而對(duì)正常細(xì)胞有保護(hù)作用。另一方面,病毒感染細(xì)胞表面的病毒抗原和其它表面分子使得其對(duì)NK細(xì)胞的殺傷作用變得更加敏感。此外,NK細(xì)胞在體外還可殺傷某些細(xì)菌、真菌、原蟲等,可能與NK細(xì)胞釋放某些殺傷介質(zhì)有關(guān)。

3. NK細(xì)胞在免疫監(jiān)視、殺傷突變的腫瘤細(xì)胞可能比T細(xì)胞具有更重要的作用。某些疾病如Chediak-Higashi或X性聯(lián)淋巴增殖綜合征患者,由于NK功能缺陷對(duì)惡性淋巴細(xì)胞增殖疾病特別易感。

4. 參與骨髓移植后移植物抗白血病效應(yīng):在體外NK細(xì)胞可殺傷某些淋巴樣和髓樣白血病細(xì)胞。骨髓移植后數(shù)周內(nèi),來(lái)自供體的NK細(xì)胞在PBL中占相當(dāng)高的比例。此外,在體內(nèi)NK細(xì)胞還可殺傷某些不成熟細(xì)胞如骨髓干細(xì)胞、胸腺細(xì)胞亞群等。

NK細(xì)胞治療方法

????治療流程:

確定患者的入選標(biāo)準(zhǔn)→相關(guān)檢查→血液采集→分離外周血單個(gè)核細(xì)胞→培養(yǎng)NK細(xì)胞→獲得NK細(xì)胞→細(xì)胞回輸→療效評(píng)估→隨訪

培養(yǎng)方法:

1、治療前檢查血常規(guī)、凝血功能等常規(guī)項(xiàng)目;

2、用血液分離機(jī)采集病人外周血淋巴細(xì)胞或直接采集外周血;

3、在GMP實(shí)驗(yàn)室里,從采集的外周血中分離出單個(gè)核細(xì)胞,經(jīng)多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)、激活后進(jìn)行增殖培養(yǎng),此過程需要9-12天。

4、于培養(yǎng)的第9-13天開始分次回輸NK細(xì)胞,每次回輸過程大概1.5個(gè)小時(shí)。

5、一個(gè)療程約14-16天。此后視情況進(jìn)行下一療程治療。

NK細(xì)胞治療特點(diǎn)

??? 1、可直接識(shí)別、殺死癌細(xì)胞,抑制腫瘤的生長(zhǎng)及擴(kuò)散;

2、可直接改善和調(diào)節(jié)患者的免疫力和神經(jīng)系統(tǒng);

3、通過其分泌的因子抑制腫瘤附近新血管的增生,限制腫瘤生長(zhǎng);

4、分泌多種細(xì)胞因子,減少患者疼痛,提高生活品質(zhì);

5、NK細(xì)胞療法可用于多種癌癥,尤其對(duì)血液腫瘤,肺癌、淋巴癌、食道癌、乳癌、肝癌等血流旺盛且血管較密集的腫瘤有很好的療效。

上一期介紹了一些免疫細(xì)胞治療經(jīng)典產(chǎn)品,今天同樣給大家推薦一些好用的產(chǎn)品,不要錯(cuò)過哦!

品牌 產(chǎn)品貨號(hào) 產(chǎn)品名稱
PALL AP-4951 Acrodisc??白細(xì)胞針頭過濾器,10/pkg
PALL AP-4952 Acrodisc??白細(xì)胞針頭過濾器,50/pkg
Peprotech 900-k25 Human TNF-α ?ELISA ?Kit
Peprotech 96-200-21 Human IL-21
Peprotech 96-200-02 Human IL-2
Peprotech 96-200-15 Human IL-15
Peprotech 05111-80 human CD3
Peprotech 06111-60 humanCD4
BD 555332 human CD3/FITC
BD 557710 human CD16 ALEXA 647
BD 555516 humanCD56/PE

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使用Ficoll方法分離效果不佳,快來(lái)試試這個(gè)! http://www.h1bg.cn/%e7%94%9f%e7%89%a9%e6%8a%80%e6%9c%af/14437.html http://www.h1bg.cn/%e7%94%9f%e7%89%a9%e6%8a%80%e6%9c%af/14437.html#respond Wed, 18 Mar 2020 02:56:01 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14437

說到白細(xì)胞的收集,大家腦海里最先涌現(xiàn)的也許是Ficoll淋巴細(xì)胞分離液吧。這種經(jīng)典方法被廣泛用于淋巴細(xì)胞的分離。然而,經(jīng)典并不意味著簡(jiǎn)單。因涉及到多次離心和洗滌,這種方法需要一定的技巧,也需要不少的時(shí)間。制備一個(gè)樣品大約要花2個(gè)小時(shí)。如果有一種方法能夠更加簡(jiǎn)單快速地收集白細(xì)胞,那想必是極好的。

 

頗爾實(shí)驗(yàn)室還真的推出了這樣一種工具——Acrodisc WBC?(白細(xì)胞收集)無(wú)菌針頭濾器。這是一種新穎的過濾裝置,專為捕獲和收集白細(xì)胞以及分離紅細(xì)胞而設(shè)計(jì)。它包含了頗爾公司專利的Leukosorb膜材質(zhì)。這種纖維狀的膜材質(zhì)可以特異性的來(lái)捕獲和收集白細(xì)胞,同時(shí)讓紅細(xì)胞和血小板流出膜。

操作過程十分簡(jiǎn)單。您只需通過標(biāo)準(zhǔn)的魯爾接口將血液樣本注入Acrodisc WBC針頭濾器,同時(shí)在收集管中捕獲任何殘留的樣本。一旦樣本被完全注入,使用適當(dāng)?shù)闹Ъ茏寴颖局绷?,以便在重力作用下通過Leukosorb膜,捕獲和收集白細(xì)胞,并讓紅細(xì)胞和血小板通過濾膜進(jìn)入收集管。整個(gè)操作過程只需要10-15分鐘。之后可利用分離介質(zhì)通過濾器反轉(zhuǎn)的方式從濾膜上用PBS洗脫捕獲的白細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步的培養(yǎng)。

操作簡(jiǎn)單固然重要,但大家更感興趣的是效果如何。與白膜層密度梯度離心的方法相比,Acrodisc WBC無(wú)菌針頭濾器這個(gè)小小的工具就完成了所有看似困難的工作,不需要反復(fù)離心,也不必?fù)?dān)心樣本丟失,效率更高。濾器能從全血樣本中去除大于99%的白細(xì)胞,同時(shí)從樣本中更多地富集紅細(xì)胞。紅細(xì)胞可以用于一系列細(xì)胞和抗原分析,而白細(xì)胞也可以用于進(jìn)一步的免疫和基因表達(dá)研究,其中60%的白細(xì)胞可以得到回收,繼續(xù)培養(yǎng)的白細(xì)胞存活率高為80%。

 

Acrodisc WBC無(wú)菌針頭濾器的有效過濾面積(EFA)為3.9 cm2。與更大的濾器產(chǎn)品相比,它可以得到更高的細(xì)胞捕獲和回收效率,同時(shí)需要更少的樣本。而與大的白細(xì)胞分離濾器相比,它的死體積非常低。在樣本總體積為12 mL時(shí),死體積不到2 mL。這也意味著您需要更少的樣本,同時(shí)頗爾實(shí)驗(yàn)室貼心的提供10個(gè)的小包裝,相當(dāng)于又省了一筆。

這種高端的針頭濾器已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中得到驗(yàn)證。通過使用Acrodisc WBC白細(xì)胞收集無(wú)菌針頭濾器可以有效地截留白細(xì)胞。

阻凝劑相容性

用以下阻凝劑測(cè)試過濾器:

●K2EDTA

●肝素鋰

●檸檬酸鈉

 

應(yīng)用

●?抗原特異性和調(diào)控研究

●?聚蔗糖試劑分離

●?細(xì)胞療法中的淋巴細(xì)胞回收

●?單克隆抗體開發(fā)

●?干細(xì)胞研究應(yīng)用

●?受體蛋白研究

●?基因分型、基因表達(dá)

 

如果您使用Ficoll方法效果不佳,或者厭倦了繁瑣的操作,不妨來(lái)試試Acrodisc WBC白細(xì)胞收集無(wú)菌針頭濾器。

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血漿治療是什么,效果怎么樣? http://www.h1bg.cn/%e6%96%b0%e6%89%8b%e4%b8%8a%e8%b7%af/14401.html http://www.h1bg.cn/%e6%96%b0%e6%89%8b%e4%b8%8a%e8%b7%af/14401.html#respond Tue, 10 Mar 2020 07:28:15 +0000 http://www.h1bg.cn/?p=14401

?此前湖北省針對(duì)新型冠狀病毒肺炎治療使用恢復(fù)期血漿,恢復(fù)期血漿治療的原理是什么?療效如何?會(huì)對(duì)疫情的發(fā)展產(chǎn)血漿治療是什么,效果怎么樣生怎樣的影響?

 

血漿治療的原理:被動(dòng)免疫

血漿治療的原理,我們需要引出一個(gè)概念:人工免疫,即根據(jù)自然免疫的原理,通過人工的方法使人體獲得特異性免疫,可分為主動(dòng)免疫(active immunity)和被動(dòng)免疫(passive immunity)。

主動(dòng)免疫,將疫苗或類毒素接種于人體,使機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施,主要用于疾病的預(yù)防,疫苗就是一個(gè)主動(dòng)免疫的典型案列。

被動(dòng)免疫,機(jī)體被動(dòng)接受抗體、致敏淋巴細(xì)胞或其產(chǎn)物所獲得的特異性免疫能力。相較主動(dòng)免疫,被動(dòng)免疫的特點(diǎn)是效應(yīng)快,一經(jīng)輸入,立即可獲得免疫力,但維持時(shí)間短,主要用于疾病的治療或緊急預(yù)防。

這次新冠肺炎中提到的恢復(fù)期血漿治療,就屬于人工免疫中的被動(dòng)免疫范疇。

經(jīng)歷細(xì)菌或病毒性感染而幸存的患者,體內(nèi)已經(jīng)對(duì)特異的病原體產(chǎn)生體液免疫,血液中通常含有高滴度的特異性抗體,而輸注恢復(fù)期血制品(convalescent blood products,CBP) 的患者可因此獲得被動(dòng)免疫,中和特異性病原體,最終清除血液循環(huán)中的病原體。

武漢金銀潭醫(yī)院院長(zhǎng)張定宇也在新聞發(fā)布會(huì)上表示:“(新冠肺炎)康復(fù)患者體內(nèi)有大量的中和抗體對(duì)抗病毒。”

 

血漿治療的歷史背景

事實(shí)上,血漿治療并非首次出現(xiàn),被動(dòng)免疫預(yù)防和治療人類傳染病可以追溯到?19 世紀(jì)。

當(dāng)時(shí)人們還沒有發(fā)現(xiàn)抗生素,通過從被感染的動(dòng)物(特別是馬、兔子)的血漿中尋找特異性抗體并對(duì)相應(yīng)人群進(jìn)行注射,短期免疫化以對(duì)抗感染病原體。

此外,1918~1920 年的西班牙流感、1920~1940 年代的猩紅熱、1970 年代的百日咳流行期間,由于當(dāng)時(shí)缺乏治療相應(yīng)疾病的特效藥,恢復(fù)期血制品都發(fā)揮了重要的作用。

 

目前,恢復(fù)期血制品治療主要用于沒有可用疫苗、沒有特異性治療的新出現(xiàn)急性嚴(yán)重病毒感染,如?SARS、Ebola、MERS(中東呼吸綜合征)等。

 

療效參考:恢復(fù)期血漿治療?SARS 感染相關(guān)研究

1 月 27 日,國(guó)家衛(wèi)健委辦公廳發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第四版)》首次提出,重型、危重型病例有條件情況下可考慮恢復(fù)期血漿治療。

在衛(wèi)健委后續(xù)更新的第五版診療方案中,同樣延續(xù)了這一治療方案。

 

該療法臨床效果如何?

據(jù)相關(guān)報(bào)道,2 月 8 日,武漢市江夏區(qū)第一人民醫(yī)院首期開展了對(duì) 3 名危重患者的新冠特免血漿治療,目前累計(jì)治療危重病人超過 10 人。臨床數(shù)據(jù)表明,患者接受治療 12~24 小時(shí)后,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要炎癥指標(biāo)明顯下降,淋巴細(xì)胞比例上升,血氧飽和度、病毒載量等指標(biāo),臨床體征和癥狀改善。

由于目前通過這一療法治愈患者數(shù)量仍然相當(dāng)有限,其療效仍舊缺乏足夠的臨床證據(jù)。

大部分新冠肺炎屬于自限性疾病,以對(duì)癥支持治療為主,以平穩(wěn)度過急性期;而且恢復(fù)期血漿治療屬于輸血治療,可能存在輸血反應(yīng),如發(fā)熱、過敏、溶血反應(yīng)、循環(huán)負(fù)荷過重、輸血傳播疾病等風(fēng)險(xiǎn)。

因此,恢復(fù)期血漿主要還是用于個(gè)別危重癥患者的挽救性治療。

 

 

目前,由于難以在短期內(nèi)發(fā)明與量產(chǎn)人工合成的特異性抗體,我們只能從恢復(fù)期患者身上采集血漿以利用其中的人源性抗體。

全國(guó)累計(jì)治愈新冠肺炎患者大于患病者,不可能所有的康復(fù)患者都愿意獻(xiàn)血且符合獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn),恢復(fù)期血漿仍是非常稀缺的醫(yī)療資源。如果沒有充足的恢復(fù)期血漿,這一療法可能只能停留在試驗(yàn)階段。

 

血漿使用是有標(biāo)準(zhǔn)的,只要符合標(biāo)準(zhǔn)就可以臨床上使用。從救治危重癥患者來(lái)看,應(yīng)該及早使用看看效果?!?/p>

此外,雖然目前小樣本臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)危重新冠肺炎有效,但根據(jù)已有的?SARS 研究,恢復(fù)期血漿治療可能只能降低 7~23% 的死亡率,效果可能不一定十分顯著。

血漿治療仍然存在著一些不確定的潛在風(fēng)險(xiǎn)。該療法對(duì)部分重癥患者可能會(huì)有幫助,但大規(guī)模應(yīng)用還缺乏必要的基礎(chǔ)研究依據(jù)。此外,考慮到重癥患者本身就存在著營(yíng)養(yǎng)和免疫失調(diào),即使輸入正常未感染者血漿也會(huì)有改善癥狀的作用,仍需要看對(duì)照組的結(jié)果。

而從倫理學(xué)角度來(lái)看,恢復(fù)期患者獻(xiàn)血對(duì)自身免疫和疾病康復(fù)有無(wú)風(fēng)險(xiǎn)?這個(gè)還需要我們進(jìn)行研究,但這些給我們治療新冠提供新的思路,華雅思創(chuàng)生物作為生物試劑行業(yè)內(nèi)的一員,愿推出高品質(zhì)、高穩(wěn)定性、高性價(jià)比的產(chǎn)品,為戰(zhàn)勝疫情貢獻(xiàn)綿薄之力。

 

 

品牌 產(chǎn)品貨號(hào) 產(chǎn)品名稱
Peprotech BGK05231 Human IL-6 Pre-Coated ELISA Kit
PALL AP-4951 白細(xì)胞針頭過濾器,10/pkg
PALL AP-4952 白細(xì)胞針頭過濾器,50/pkg
QIAGEN 52904 QIAamp Viral RNA Mini Kit?病毒RNA提取試劑盒
Peprotech BGK05231 Human IL-6 Pre-Coated ELISA Kit
PALL AP-4951 白細(xì)胞針頭過濾器,10/pkg
PALL AP-4952 白細(xì)胞針頭過濾器,50/pkg
QIAGEN 52904 QIAamp Viral RNA Mini Kit?病毒RNA提取試劑盒
QIAGEN 762164 PAXgene Blood RNA Kit
QIAGEN 762174 PAXgene Blood RNA Kit (50)
QIAGEN 74104 總RNA小量提取試劑盒
Thermo KIT0204 /KIT0214 PicoPure? RNA Isolation Kit
Thermo 15596026/15596018 TRIZOL RNA提取試劑
Corning 88-571-kit Corning NK細(xì)胞培養(yǎng)套裝?KIT-Ⅱ
Corning 88-581-CM 康寧Corning免疫細(xì)胞培養(yǎng)基
Corning 88-551-CM 康寧Corning DC/CIK?細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基
LONZA 04-418Q 免疫細(xì)胞治療無(wú)血清培養(yǎng)基
Mabtech 3880-1AD-6 人IgG ELISA開發(fā)試劑盒(ALP)
GeneTex GTX36951 IgM ELISA Kit
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